جداسازی، همسانه سازی و بیان ژن های کدکننده ی گلوکان سوکرازهای باکتری lactobacillus sp. در گیاه چغندرقند

گلوکان سوکرازها (gss) یا گلیکوزیل ترانسفرازها (gtfs)، آنزیم های برون سلولی بزرگی هستند که قادرند گلوکان های مختلفی (دکستران، موتان، آلترنان و روتران) را از ساکارز تولید کنند. باکتری های اسیدلاکتیک قادر به تولید این آنزیم ها هستند که به طور سنتی در مواد غذایی و محصولات تخمیری وجود دارند. با توجه به خواص بسیار زیاد و مفید این باکتری ها در زندگی و سلامت انسان، جداسازی و شناسایی این باکتری ها به ویژه باکتری های اسیدلاکتیک حاوی گلوکان سوکرازها از منابع جدید و در دسترس از اهمیت ویژه ای برخوردار است. هدف از این مطالعه شناسایی باکتری های اسیدلاکتیک شیر الاغ با استفاده از روش های بیوشیمیایی، فنوتیپی و مولکولی، به منظور یافتن سویه های تولیدکننده گلوکان سوکراز بود. نتایج بیوشیمیایی این مطالعه نشان داد که باکتری های جداسازی شده عمدتاً متعلق به دو جنس انتروکوکوس و استرپتوکوکوس بودند. بر اساس نتایج روش های فنوتیپی (ftir) و مولکولی (s rrna16) باکتری های جنس انتروکوکوس متعلق به گونه فکالیس بودند. آغازگرهای هرز نتوانستند ژن های گلوکان سوکراز را در این باکتری شناسایی کنند. نتایج آزمون تعیین حساسیت (آنتی بیوگرام) و شناسایی ژ ن های بیماری زایی باکتری انتروکوکوس فکالیس نشان داد که این باکتری فاقد ژن بیماری زایی esp، اما دارای ژن های بیماری زایی as، efaa، ace و gele بودند. استفاده از گیاهان برای تولید پلیمرهای جدید یک فنّاوری ضروری و بسیار شگفت انگیزاست. گیاهان تراریخت به عنوان کارخانه های زیستی مفید و جالب برای تولید ارزان و فراوان درشت مولکول های نوترکیب و فعال مثل ترکیبات خونی، واکسن ها، فاکتور های رشد، آنتی بادی ها، آنزیم ها و پلیمرهای زیستی با کمترین خطر برای مصرف کننده انسانی بسیار موردتوجه می باشند. موتان پلی گلوکانی است که واحدهای گلوکز سازنده ی آن عمدتاً توسط پیوند های a (1?3) به هم متصل شده اند و توسط استرپتوکوک های مختلف و لاکتوباسیلوس روتری سنتز می شود. به منظور تولید این پلیمر زیستی مهم در گیاه چغندرقند به دلیل وجود مقادیر زیاد ساکارز، ناقل pbinplus حاوی ژن gtfi با کمک اگروباکتریوم تومفاسینس نژاد gv3101 به ریزنمونه های چغندرقند منتقل شد. نتایج این مطالعه نشان داد که ژن کدکننده ی موتان سوکراز به ژنوم چغندرهای تراریخت منتقل شده است. گیاهان تراریخت چغندرقند برای زمستان گذرانی در دمای 4 درجه سانتی گراد به مدت2 ماه قرار گرفتند.